《紧急审讯室2》中，原警视厅特殊犯罪搜查系（SIT）主任真壁有希子（天海佑希 饰）因工作调动，来到搜查一课紧急案件对应审讯班。经过一段时间的磨合，她与梶山胜利（田中哲司 饰）、菱本进（点点 饰）、中田善次郎（大杉涟 饰）、小石川春夫（小日向文世 饰）等人从最初的争执不断，逐渐建立起值得信赖的同袍情谊。
与此同时，搜查一课的监物大二郎（铃木浩介 饰）和渡边铁次（速水直道 饰）这对活宝搭档，虽然起初并不情愿，却也慢慢融入审讯班，成为突破嫌疑人心理防线的重要力量。面对节奏越来越快、世风日下的现代社会，有希子一行人必须迎战更加狡猾、也更善于隐藏杀意的对手。
