《皇家师姐》中，督察吴落茜（杨紫琼 饰）身手不凡、嫉恶如仇。一天，她赴约时意外发现好友遇害。好友是来自伦敦的调查员，生前因掌握田氏集团伪造合约的胶片而遭到杀害。案发当日，两个闯入宾馆行窃的小偷散利痛（孟海 饰）和止立消（岑建勋 饰）无意间偷走了藏有胶片的护照，随后将护照交给师兄脱苦海（徐克 饰），由他负责加工并出售。
与此同时，伦敦方面派出女警麦瑞（罗芙洛 饰）前往香港，调查调查员遇害一案。为了摆脱嫌疑，脱苦海师兄弟三人向警方告密，却因此遭到假护照买家的报复。一直暗中谋划夺回胶片的田氏集团也派出杀手，追查脱苦海等人的行踪。面对多方势力，吴落茜与麦瑞组成的女警搭档只得联手脱苦海等人，与田氏集团展开一场斗智斗勇的较量。
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