《杀手胭脂泪粤语》讲述山贼猖獗之时，穆玲（叶玉萍饰）与父亲胜奋勇抗敌，虽然成功击退山贼，胜却不幸战死。官兵赶到后不仅没有出手相助，反而洗劫穆家村。穆玲心中不忿，失手杀死官兵头目，因此遭到追捕。逃亡途中，她得到丝绸商杜明（吴启明饰）仗义相救，成功躲过官府搜查。东厂教头寒羽（刘锡明饰）欣赏穆玲的胆识，设局迫使她加入东厂成立的杀手组织。穆玲起初极力反抗，几度试图逃走，最终还是接受寒羽的训练。厂公（徐忠信饰）巡视训练时认定穆玲心怀异志，下令寒羽将她杀掉。寒羽不但设法救下穆玲，还以性命为她担保，使她逃过一劫，两人的感情也逐渐加深。后来，厂公派穆玲执行屠杀清官全家的任务，她发现目标竟是杜明一家，因不忍下手而出面阻止。厂公随即命寒羽杀死穆玲，寒羽暗中制造机会让她逃脱。厂公得知后率兵追杀二人，穆玲与寒羽寡不敌众，危急之际，死里逃生的杜明现身，并与厂公同归于尽。最终，穆玲与寒羽携手逃离，浪迹天涯。
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