《光绪皇夜祭珍妃粤语》讲述光绪帝即将选后时，属意于将军长叙的次女珍儿。此时清廷刚败于日本，光绪得知军费被掌握大权的慈禧太后挪作修建颐和园之用，深感愤懑，决心变法图强。然而大选当日，慈禧在权臣荣禄和宠监李连英的协助下暗中操纵选后结果，立自己的侄女为皇后，珍儿只能屈居妃位，光绪对此无可奈何。
珍妃深受光绪宠爱，因而遭到皇后嫉恨。一次，皇后请珍妃为她荐人，却被珍妃冷言拒绝，皇后遂进宫向慈禧搬弄是非，导致珍妃当众受辱。光绪不甘继续做傀儡，在珍妃鼓励下连夜秘密召见直隶按察使袁世凯，计划诛除荣禄，再迫慈禧交出政权。没想到袁世凯临阵倒戈，出卖光绪，慈禧随即发动政变，将光绪幽禁于瀛台，并把珍妃贬往北三所。
身处冷宫的珍妃寂寞凄凉，光绪只得假扮太监前来与她私会，此时两人才得知八国联军已经逼近京师。慈禧仓皇出逃前召见珍妃，希望她劝光绪一同逃走，但珍妃反而以大义相责，坚决劝光绪留在京城。慈禧恼羞成怒，下令将珍妃投入井中。光绪悲痛欲绝，返京后在井畔彻夜祭奠珍妃，回忆往日种种，不禁泪如雨下。
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