《哎哟我的妈！》围绕杨家一大家子的生活展开。杨家住在一栋半独立式洋房里，大儿子大富（周初明饰）早已成家，自立门户；女儿娇贵（潘玲玲饰）也已经出嫁。如今，退休后的杨老妈（朱咪咪饰）与老三光荣（杨志龙饰）、中国媳妇温柔（张艳冰饰）以及小儿子德华同住一屋。婆媳之间原本就不乏摩擦，没想到家中很快又迎来更令人头疼的变化。
一天晚上，大富突然带着妻子美凤（权怡凤饰）和6岁女儿思琦回到杨家。得知儿子和孙女要搬回来，杨老妈自然十分高兴，可看到美凤也一同出现，她却立刻感到不是滋味。原来，当年大富决定搬出去另立家庭，正是美凤的主意。
杨老妈过去曾在政府部门担任小主管，习惯以铁腕手段管理下属。退休后，她把这套作风带回家中，不仅用强硬方式管教孩子，还事事掌控家里的大小事务，连丈夫也被她管得服服帖帖。杨老爸（陈建彬饰）是一名教师，对妻子始终百依百顺，在他看来，拥有一个能干的老婆也是一种福气。可惜十年前，他因心脏病发作去世，家中只留下供奉着遗照的灵位。每当夜深人静，尤其是遇到不顺心的事情时，杨老妈总会想起与老伴相伴走过的岁月，以及他曾经给予自己的体贴与包容。
大富和美凤是在大富赴台湾接受军训期间认识的，两人一见钟情，很快陷入热恋。一次意外让美凤怀孕，在女方家人的压力下，大富只好迎娶美凤。婚后，两人组成自己的小家庭，并生下女儿思琦，昵称“囡囡”，日子原本过得幸福甜蜜。没想到大富突然被一家大企业裁员，失去工作，只能无奈接受一份薪水较低的职位。为了节省开支，他把原本居住的公寓租了出去，带着妻子和女儿搬回杨家。
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