猫和老鼠：绿野仙踪讲述了少女桃乐丝（格蕾·德丽斯勒 Grey DeLisle 配音）与亨利叔叔（Stephen Root 配音）、艾姆婶婶（Frances Conroy 配音）在远离大都会的西部荒野小镇相依生活的故事。一天，严厉的治安官高驰小姐试图带走桃乐丝最心爱的小狗托托，让她陷入深深的失落之中。幸好，汤姆和杰瑞这对欢喜冤家及时出手，帮助桃乐丝救回了托托。然而，一场猛烈的龙卷风突然席卷小镇，将桃乐丝的房子卷上半空，最终带着她和托托降落在一片陌生、神秘而繁花盛开的土地上。
汤姆和杰瑞也阴差阳错地来到这里，并遇见了小矮鼠泰菲（Joe Alaskey 配音）。泰菲向他们讲述了房子压死东方女巫，以及西方女巫企图夺走桃乐丝红宝石鞋的经过。随后，汤姆、杰瑞和泰菲跟随桃乐丝的足迹，踏上了前往翡翠城、寻找奥兹巫师的惊险旅程。
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