《玩具总动员之惊魂夜》讲述了一个风雨肆虐的夜晚。邦妮（艾米丽·哈恩 Emily Hahn 配音）和妈妈驾车行驶在漫长公路上，而后备箱里，牛仔胡迪（汤姆·汉克斯 Tom Hanks 配音）、巴斯光年（蒂姆·艾伦 Tim Allen 配音）、杰西（琼·库萨克 Joan Cusack 配音）等玩具正聚在一起观看恐怖电影，消磨旅途中的无聊时光。没想到汽车突然爆胎，邦妮母女只好暂时入住名为“好梦”（SleepWell）的汽车旅馆，等待第二天救援车赶来。夜幕降临后，玩具们结伴离开房间展开探索，可再次集合时，却发现蛋头先生神秘失踪。胡迪等人随即分头寻找，却接连遭遇伙伴离奇消失的怪事。电影中的恐怖情节仿佛成为现实，患有幽闭恐惧症的杰西也在不知不觉间承担起营救伙伴的重任。
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