《陀枪师姐2021粤语》中，督察戴安娜（宣萱 饰）一直在档案管理岗位过着安稳的后勤生活。一次机缘巧合，她与元祖级陀枪师姐陈三元（滕丽名 饰）及飞虎队男神蒙汉森（陈豪 饰）联手破案，随后获上司韦展超（许绍雄 饰）安排加入悬案小组。在汉森带领下，安娜与一群各具特色的警员共同调查那些鲜有人关注的悬案。
汉森起初对安娜颇有不满，两人经常针锋相对。直到安娜曾遭人胁持、因此害怕使用枪械的往事被揭开，他们之间的关系也逐渐发生变化，并擦出爱情火花。与此同时，安娜重遇多年前那宗灭门惨案中的补习学生刘达华（罗子溢 饰），却发现他如今已经投身黑道。面对感情与内疚的双重推动，安娜能否克服恐惧、重新拿起手枪，成为新一代的“陀枪师姐”？
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